Протеолиз сывороточных белков алкалазой

Abstract

The objective of this study was to characterize the changes in proteolysis of whey proteins, as β-lactoglobulin (β-lg) and α-lactalbumin (α-la) that are the main allergens of milk, resulting from different physicochemical conditions of hydrolysis with a protease from Bacillus licheniformis (alcalase). The features of proteolysis subject to enzyme concentration, temperature and pH were received using SDS-PAGE analysis. The effect of рН on the process was studied: hydrolysis of whey proteins occurred more intensively when pH increased 6÷10 for β-lg and 7÷10 for α-la. Results obtaining at 20÷60 ºC supported that degree of proteolysis increased with higher temperature. Different substratum specificity was shown for alcalase because β-lg was degraded with protease faster than α-la in similar conditions at pH 7÷10 (37 ºС), whole range of temperature (20÷60 ºС) at pH 8. = Изучены особенности протеолиза сывороточных белков α-лактальбумина (α-ла) и β-лактоглобулина (β-лг), которые являются основными аллергенами молока, протеазой из Bacillus licheniformis (алкалазой) в различных физико-химических ус- ловиях. С помощью SDS-электрофоретического анализа в полиакриламидном геле установлены закономерности гидролиза β-лг и α-ла в зависимости от концентрации алкалазы, температуры и рН ферментативной системы. Показано, что количество подвергнутого гидролизу β-лг возрастает в диапазоне рН 6÷10, а в случае α-ла – при рН 7÷10. Для обоих белковых субстратов выявлено увеличение степени протеолиза с возрастанием температуры в пределах 20÷60 ºС. Для алкалазы установлена различная субстратная пецифичность: β-лг расщепляется более интенсивно, чем α-ла, при рН 7÷10 и температуре 37 ºС, а также в диапазоне 20÷60 ºС при рН 8.