Механизмы регуляции клеточных процессов галогенированными катионными белками лейкоцитов и их комплексами в условиях окислительного стресса. Задание 1.54 Государственной программы научных исследований Биотехнологии : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель И. В. Горудко

Abstract

Объектами исследования являются миелопероксидаза (МПО), лактоферрин (ЛФ), церулоплазмин (ЦП), хлорноватистая кислота (HOCl). Цель работы – получение новых данных о механизмах регуляции клеточных процессов модифицированными в условиях окислительного/галогенирующего стресса катионными белками лейкоцитов и их комплексами. Основными методами исследования являются центрифугирование, гель-электрофорез, флуоресцентная спектроскопия, а также спектроскопия комбинационного рассеяния. В результате с помощью методов флуоресцентного анализа и спектроскопии комбинационного рассеяния выявлено, что модификация катионных белков лейкоцитов при действии HOCl сопровождается разрушением триптофановых остатков, уменьшением числа первичных аминов и гидрофобных участков в составе исследованных белков и нарушениями вторичной структуры белков. Показано, что краситель целестиновый синий B (CB: C.I. 51050) избирательно окисляется при действии HOCl и хлорамина таурина. Флуоресцентный анализ белков с применением красителя CB позволяет с высокой точностью обнаруживать галогенированные функциональные группы в белковых молекулах (хлорамины, бромамины и др.). Установлено, что ЛФ, модифицированный гипогалоидными кислотами, теряет способность образовывать комплексы с ЦП и связывать ионы железа. Галогенированный ЛФ, в отличие от нативного, не оказывал праймирующего эффекта на рецептор-опосредованный респираторный взрыв и секреторную дегрануляцию нейтрофилов, а также терял способность модулировать функциональные ответы тромбоцитов. Научная значимость НИР заключается в том, что она вносит существенный вклад в понимание механизмов изменения функциональных свойств катионных белков лейкоцитов в условиях окислительного/галогенирующего стресса.