Получение рекомбинантного эндолизина PlyG в бактериях Escherichia coli и выявление его антибациллярной активности

Abstract

Энзибиотики – многообещающая группа противомикробных препаратов, основу которых составляют эндолизины, ферменты, кодируемые бактериофагами. Белок PlyG, эндолизин γ-фага бактерий Bacillus anthracis, специфически инфицирует бактерии группы Bacillus cereus и лизирует их клеточную стенку. Цель данной работы – получение на основе бактерий штамма E. coli BL21-Gold(DE3) продуцента рекомбинантного белка PlyG, а также выявление активности растворимой формы белка PlyG в составе лизата продуцента в отношении вегетативных клеток бактерий B. cereus. В результате работы получен штамм E. coli Gold-pPlyG, в клетках которого накапливается белок PlyG массой около 27 кДа. Для этого в клетках штамма Е. coli BL21-Gold(DE3) в составе вектора pET-24b(+) клонировали оптимизированный для экспрессии ген plyG, кодирующий эндолизин PlyG. Установлено, что целевой белок в клетках штамма, обозначенного как E. coli Gold-pPlyG, накапливается преимущественно в нерастворимой форме, но литическая активность его растворимой формы в отношении вегетативных клеток бактерий B. cereus не выявлена