Разработать и изготовить электрохимический ДНК-наносенсорный комплекс для драйв-тестинга гибридизации и комплексообразования ДНК : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель Г. В. Крылова

Abstract

Объектом исследования является электрохимический ДНК-наносенсорный комплекс для драйв-тестинга гибридизации и комплексообразования ДНК. Цели проекта: разработка и изготовление научно-лабораторной емкостной электрохимической ДНК-наносенсорной системы с электрохимическими драйв-тестами гибридизации и комплексообразования ДНК для идентификации однонуклеотидного полиморфизма (SNP). В результате создан и изготовлен комплекс ДНК-наносенсоров по электрохимическому детектированию гибридизации односпиральной ДНК-мишени с ДНК-зондом с точностью до одной ошибки в ДНК-последовательности включительно с выделением гомо- и гетеродуплексных вкладов в сигнал ДНК-сенсора на платформе олигонуклеотидных комплексов углеродных нанотрубок (УНТ) и проводящих полимеров (значение предельных концентраций в измерениях для олигонуклеотидов порядка 100 – 200 наноМолей); рассчитан, проанализирован и осуществлен выбор конструкции и технологии изготовления чувствительного элемента (ЧЭ) электрохимического преобразователя; разработана конструкторская и технологическая документация на ЧЭ. создана технология драйв-тестинга SNP, изготовлена система драйв-тестов для определения мутационного статуса гена KRAS с использованием принципа «label-free» детектирования методами диэлектрической спектроскопии; разработана технология процесса тестирования аллельной дискриминации SNP; показано, что детектируемые концентрации ДНК являются низкими относительно используемых для проведения аллель-специфического ДНК анализа ПЦР-методами.