Идентификация геми-формы миелопероксидазы и изучение ее функциональных свойств в условиях окислительного/галогенирующего стресса и воспаления : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель С. Н. Черенкевич

Abstract

Объектом исследования являются эритроциты, тромбоциты и нейтрофилы крови человека. Цель работы – изучение основных свойств геми-формы миелопероксидазы (геми-МПО), образующейся в условиях окислительного/галогенирующего стресса. Основные методы исследований: центрифугирование, фотометрический и флуоресцентный методы, методы сканирующей электронной, атомно-силовой и лазерной конфокальной микроскопии. В результате впервые установлено, что в присутствии как мономерной МПО, так и димерной МПО происходит реорганизация актинового цитоскелета тромбоцитов и нейтрофилов, однако эффект геми-МПО выражен слабее. Действие геми-МПО на увеличение концентрации внутриклеточных свободных ионов кальция в нейтрофилах, а также экзоцитоз лизоцима и эластазы из этих клеток были также значительно ниже, чем в случае димерной МПО. Геми-МПО, в отличие от димерной МПО, практически полностью теряла способность усиливать АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов и инициировать образование гетероагрегатов тромбоцитов с нейтрофилами. Показано, что в присутствии геми-МПО, также как и димерной МПО, уменьшается устойчивость эритроцитов к гемолизу, изменяются трансмембранный потенциал клеток, а также морфология и размеры клеток. Данный эффект геми-МПО не зависит от каталитической активности фермента и выражен слабее, по сравнению с димерной формой МПО. Научная значимость НИР заключается в том, что она вносит существенный вклад в выяснение механизмов функционирования МПО при патологических процессах, что будет использовано для разработки новых методов профилактики и лечения воспалительных заболеваний. Образование мономерной МПО может служить важным фактором, регулирующим выраженность окислительного/галогенирующего стресса при воспалении.