Особенности экспрессии химерного гена антимикробного пептида лягушки и эндолизина бактериофага К в бактериях Esсhe- richia coli

Abstract

Исследовалось клонирование и изучались особенности экспрессии в клетках E. coli химерного гена, состоящего из генов антимикробного пептида лягушки (Rana esculenta L., 1758) эскулентина и эндолизина бактериофага К семейства Myoviridae. Разработаны праймеры для слияния генов эскулентина и эндолизина стафилококкового бактериофага К для получения химерного белка с гистидиновой меткой на С-конце. Гибридный ген клонирован в клетках бактерий E. coli и секвенирован. В результате индукции экспрессии гена установлено внутриклеточное накопление химерного белка эскулентин-С / эндолизин КHis, который синтезируется в клетках E. coli преимущественно в нерастворимой форме, однако часть белковых молекул остается растворимой и проявляет литическую активность против живых клеток Staphylococcus aureus. Области применения: биотехнология, молекулярная биология, фармацевтика. = The aim of this study was cloning and expression analysis of hybrid gene consisted of frog (Rana esculenta L., 1758) antimicrobial peptide esculentin gene and the Myoviridae family staphylococcal bacteriophage K endolysin gene in Е. coli cells. Primers to fuse esculentin and staphylococcal bacteriophage K endolysin genes were designed to obtain the chimeric protein with His-tag at the C-terminus. The hybrid gene was cloned in E. coli cells and sequenced. The subsequent analysis of gene expression revealed the intracellular accumulation of fusion protein esculentin-C / endolysin KHis. Recombinant protein accumulated in E. coli cells predominantly in the insoluble form, but some of protein molecules remained soluble and exhibited antistaphylococcal activity. Applications: biotechnology, molecular biology, pharmaceutics.