Конструирование бинарных векторов для переноса и эффективной экспрессии генов hrpJ и hrpW в эукариотической клетке

Abstract

Effectiveness of bacterial gene expression in plant ceils depends on different factors, first and foremost on the nucleotide composition of this gene. Essential conditions of effective realization of prokaryotic ge netic information are adequacy of codon usage frequency of transferred gene and plant DNA, and absence of sequences, which can be recognized as sites of splicing. Our investigations showed, that sequence of bacterial genes hrpJ and hrpW, which are to be transferred into plant genome do not need preliminary modifications. Binary vectors for transfer and effective expression of hrpJ and hrpW were constructed. = Проведено исследование эффективности экспрессии переносимых последовательностей в эукариотическом геноме: сравнение частот использования кодонов в экспрессируемом гене и ДНК растения, поиск в их нуклеотидных последовательностях областей, которые могут распознаваться в клетках растения как интроны или сайты полиаденилирования. Показано, что в бактериальных генах отсутствуют редкие для генома табака кодоны, нет сайтов сплайсирования и полиаденилирования. Из этого можно заключить, что не будет проходить терминации трансляции этого гена в клетках модельного организма и нет предпосылок для альтернативного сплайсинга в эукариотических клетках. Сконструированы бинарные векторы, несущие под контролем эукариотического промотора и терминатора гены фитопатогенной бактерии Erwinia carotovora subsp. atroseptica hrpJ и hrpW (рВiР-J и рВiР-W соответственно).