Регистрация флуоресценции зондов на основе полиметиновых красителей в тканях in vivo

Abstract

Отмечено, что высокий уровень рассеяния света и собственная люминесценция биологических тканей in vivo создают помехи для корректной регистрации флуоресцентных зондов в таких системах. Осуществлена оптимизация условий регистрации флуоресценции полиметиновых красителей в тканях in vivo. Установлено, что для уменьшения влияния собственного свечения биотканей при регистрации флуоресценции в спектральном диапазоне 710 – 900 нм in vivo следует использовать для возбуждения излучение лазерных источников с длиной волны более 676 нм. Показано, что для подавления в спектрометре на три порядка уровня рассеянного света от возбуждающего лазера с длиной волны l, равной 682 нм, оптимальным является использование абсорбционного светофильтра марки СЗС-20, который не люминесцирует в исследованном спектральном диапазоне. Путем сканирования световодом поверхности опухолевого узла определено, что при наличии некроза тканей сигнал флуоресценции полиметинового красителя в этой области в 3–5 раз меньше по сравнению с остальными частями опухоли. = A high level of light scattering and intrinsic luminescence of biological tissues in vivo interfere with correct recording of signals from fluorescent probes in such systems. This work presents the optimized conditions for recording of polymethine dye fluorescence in the tissues in vivo. It has been found that, to lower the effect of intrinsic luminescence of biotissues when fluorescence is recorded in vivo over the spectral range 710 – 900 nm, the wavelength of laser sources used for excitation should be above 676 nm. It has been shown that the use of a СЗС-20 absorption light filter revealing no luminescence over the spectral range under study is optimal to lower in a spectrometer a level of scattered light from the excitation laser (  682 nm) by three orders. By scanning an optical fiber over the surface of the tumor node, it has been demonstrated that in the case of necrotic tissues the fluorescence signal of polymethine dye in this region is lower by a factor of 3–5 as compared to other parts of the tumor.