2. Создание трансгенных растений, экспресирующих биологически активные белки, для их использования в качестве ветеринарного препарата нового поколения в птицеводстве : подпрограмма «Сельскохозяйственная биотехнология (растениеводство)» ГП «Инновационные биотехнологии» : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ; научный руководитель В.А. Прокулевич

Abstract

Объектами исследований являлись ген и белок куриного альфа-интерферона, штаммы для трансформации Аgrobacterium tumefaciens GV3101-MP90 и E. coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL pSynt2451, а также растительные культуры рапса - Brássica nápus, и табака - Nicotiana benthamiana. Целями работы являлось получение белка куриного альфа интерферона, детерминируемого синтетическим геном, адаптированным для экспрессии в эукариотических растительных клетках, который способен сохранять видоспецифическую антивирусную активность и может быть использован как антивирусный иммуномодулирующий компонент лечебно-профилактических препаратов. Методы исследования: микробиологические, генетические, биохимические и молекулярно-биологические, иммунологические, токсикологические. В процессе исследований были использованы следующие приборы: аппараты для вертикального и горизонтального гель-электрофореза, амплификатор, автоматический секвенатор, весы лабораторные аналитические, центрифуги, термостаты, холодильники, сушильные шкафы, автоклав, спектрофотометр. В результате проверки антивирусной активности белка куриного альфа интерферона, детерминируемого синтетическим геном, проведена работа по экспрессии адаптированного к биосинтезу в растениях белка интерферона в бактериях. Синтетическая последовательность структурной части адаптированного гена куриного интерферона была клонирована в составе вектора pET24b(+) по сайтам рестриктаз Nde I и Eco RI для последующей трансформации в клетки E. coli. В индуцированной культуре штамма E. coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL pSynt2451 накапливался белок по молекулярной массе идентичный белку куриного альфа-интерферона. Таким образом, создана система для трансформации растительных организмов адаптированным геном куриного альфа-интерферона, продукт которого сохраняет антивирусную активность, что позволяет получать генетически модифицированные растения, продуцирующие активный куриный альфа-интерферон.