Механизмы регуляции миелопероксидазой функциональных ответов клеток при воспалении : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / научный руководитель С. Н. Черенкевич

Abstract

Объектом исследования являются тромбоциты, эритроциты и нейтрофилы крови человека. Цель работы – установление факта связывания миелопероксидазы (МПО) с клетками крови, выяснение механизмов МПО-зависимой регуляции их структурно-функциональных свойств и разработка новых подходов для регуляции функционирования МПО в очаге воспаления. Основными методами исследований являются: фотометрический и флуоресцентный методы; методы световой, электронной и лазерной конфокальной микроскопии. В результате исследований установлено, что связывание МПО с тромбоцитами сопровождается деполимеризацией примембранного F-актина, увеличением концентрации внутриклеточного Са2+ в результате его депо-зависимого входа в цитозоль тромбоцитов, а также снижением модуля упругости тромбоцитов. Выявлено, что МПО потенциирует агонист-индуцированную агрегацию тромбоцитов и инициирует образование гетероагрегатов тромбоцитов с нейтрофилами. Впервые продемонстрировано, что МПО связывается с поверхностными структурами эритроцитов, причем взаимодействие МПО с эритроцитами является углевод-зависимым и имеет электростатическую природу. Установлено, что в присутствии МПО дозо-зависимым образом уменьшается устойчивость эритроцитов к кислотному и осмотическому гемолизу. Усиление кислотного и осмотического гемолиза эритроцитов после добавления МПО не зависит от ее ферментативной активности, а обусловлено взаимодействием фермента с компонентами плазматической мембраны. Установлено, что взаимодействие эритроцитов с МПО сопровождается увеличением индекса ригидности эритроцитов, что свидетельствует об уменьшении способности клеток к деформации. Научная значимость выполненной НИР заключается в том, что она вносит существенный вклад в выяснение патофизиологической роли МПО в развитии воспалительных процессов и свидетельствуют о том, что помимо каталитической функции, обеспечивающей продукцию реакционных окислителей, МПО способна связываться с поверхностными структурами клеток крови и оказывать влияние на основные функции клеток независимо от своей ферментативной активности.