Определение растворимости в клетках бактерий Escherichia coli фьюжн-белков SUMO-DADB и SUMO-DADBHis, включающих главные антигенные домены гликопротеина Е2 вируса диареи крупного рогатого скота 2-го типа

Abstract

Заболевание, вызываемое вирусом диареи крупного рогатого скота (BVDV), приносит значительные экономические убытки во многих странах. Гликопротеин Е2 липидной оболочки вируса, а именно его первые два антигенных домена А и В могут выступать в качестве субъединицы для создания рекомбинантной вакцины. Однако экспрессия генов, кодирующих полноразмерный вариант белка Е2 и усеченный, содержащий первые два домена, в бактериальных клетках Е. coli сопровождается образованием нерастворимых телец включения. Целью данной работы являлась индукция экспрессии гибридных генов SUMO-DADB и SUMO-DADBHis, состоящих из генов, кодирующих главные антигенные домены А и В гликопротеина Е2 BVDV 2-ого типа, объединенных с геном белка малого убиквитин-подобного модификатора дрожжей Saccharomyces cerevisiae. В результате индукции экспрессии гибридных генов SUMO-DADB, SUMO-DADBHis в клетках штамма Е. coli BL21 (DE3) при температурах культивирования 37 °С и 20 °С выявили целевые белки, также синтезирующиеся в нерастворимой форме