Новые антимикробные пептиды медицинской пиявки Hirudo medicinalis: бактерицидная активность и взаимодействие с нейтрофильными лейкоцитами крови, в том числе в условиях окислительного / галогенирующего стресса : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель И. В. Горудко

Abstract

Объектпами исследования являются антимикробные пептиды (АМП) и нейтрофилы крови человека. Цель работы – установление механизмов влияния АМП медицинской пиявки Hirudo medicinalis на функции нейтрофилов, ферментативную и бактерицидную активность их гранулярных белков в условиях галогенирующего стресса. Основными методами исследований являются: центрифугирование, фотометрический и флуоресцентный методы, методы сканирующей электронной и лазерной конфокальной микроскопии. В результате исследований впервые установлено, что после модификации HOCl АМП 536_1 и 19347_2 сохраняли способность ингибировать, а 12530 – усиливать пероксидазную активность миелопероксидазы (МПО). В отличие от нативного, галогенированный АМП 3967_1 ингибировал активность МПО. В присутствии АМП 3967_1 активность эластазы незначительно увеличивалась, в то время как АМП 19347_2 ингибировал активность фермента, причем сохранял эту способность и после модификации HOCl. Ингибирование активности лизоцима наблюдалось в присутствии нативного АМП 3967_1, а также нативного и галогенированного АМП 536_1. После модификации HOCl АМП 3967_1 усиливал, в то время как АМП 12530, наоборот, ингибировал активность лизоцима. Показано, что АМП медицинской пиявки Hirudo medicinalis стимулировали функциональную активность нейтрофилов, индуцируя реорганизацию актинового цитоскелета, респираторный взрыв и дегрануляцию специфических и азурофильных гранул. Все используемые АМП усиливали РМА-индуцированный нетоз, и только АМП 536_1 стимулировал нетоз в интактных клетках. Научная значимость НИР заключается в том, что полученные результаты вносят существенный вклад в выяснение механизмов взаимного влияния нейтрофильного звена врожденной иммунной системы и гетерологичных АМП, что представляется перспективным для разработки на их основе новых лекарственных средств с бифункциональными свойствами.