Разработка методов фракционирования и очистки отдельных компонентов феназинового комплекса антибиотиков – бактерий Pseudomonas chlororaphis subsp. aurantiaca – и изучение их антимикробной и антираковой активности : отчет о научно-исследовательской и опытно-конструкторской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель Н. П. Максимова

Abstract

Объектами исследования являются P. chlororaphis subsp. aurantiaca B-162 и полученные на их основе мутантные и генно-инженерные штаммы-продуценты феназиновых антибиотиков. Предмет исследования – методы выделения индивидуальных производных феназин-1-карбоксидалата и их биологическая активность. Цель работы – создание методов фракционирования и очистки компонентов феназинового комплекса антибиотиков бактерий Pseudomonas chlororaphis subsp. aurantiaca и исследование механизмов биологического действия индивидуальных типов феназинов. Основными методами исследований являются спектрофотометрический анализ, ТФЭ, микробиологические методы, цитологические методы, методы световой микроскопии, а также протеомный анализ. В результате проделанной работы была создана методика получения кристаллических структур 2-гидроксифеназина, карбоксифеназина, 2-гидрокси-1-карбоксифеназина и 1,6-дигидроксифеназина. Проведено иследование биологической активности 2-гидроксифеназина, карбоксифеназина, 2-гидрокси-1-карбоксифеназина и 1,6-дигидроксифеназина в отношении бактерий родов Klebsiella, Salmonella, Enteral, Enterobacter, Pseudomonas, а также дрожжей рода Candida и грибов родов Trichophyton, Acremonium, Aspergillus. Проведенные исследования продемонстрировали, что 2-гидрокси-1-карбоксифеназина и 1,6-дигидроксифеназина проявляют наиболее высокий уровень антимикробной активности. Проведен детальный анализ геномов штаммов бактерий P. chlororaphis subsp aurantiaca и идентифицированы мутации, которые могли стать причиной приобретения способности к синтезу феназинов на минимальных средах. Проведен протеомный анализ 8 штаммов бактерий P. chlororaphis subsp. aurantiaca. Идентифицировано более 1030 белков, 144 из которых были получены в высоком качестве, что позволило определить их количественное соотношение в клетках различных штаммов. Эксперименты по анализу биологической активности очищенных препаратов феназиновых антибиотиков штаммов P. chlororaphis subsp. aurantiaca в отношении патогенных представителей различных видов рода Candida продемонстрировали, что наиболее эффективными оказались комплексы штаммов В-162/255, В 162/17 и В-162/2. Полученные результаты могут найти свое применение в ветеринарии и медицине, а также в исследовательской работе. Штаммы-продуценты, а также феназиновые комплексы могут быть внедрены в рамках ГП для производства экспериментальных лекарственных форм.