Перенос компонентов системы CRISPR/Cas9 в клетки человека in vitro

Abstract

Получена линия клеток эмбриональной почки человека HEK293T, стабильно экспрессирующая ген гид РНК к 8 экзону гена RUNX1T1 и ген нуклеазы Cas9. Для достижения поставленной цели в два этапа была проведена котрансфекция клеток HEK293T векторами лентивирусной системы, несущими целевые гены, сбор полученных вирусных частиц и лентивирусная трансдукция линии HEK293Tс последующей селекцией трансдуктантов. Определены разведения вирусного супернатанта, с использованием которых возможно эффективное осуществление лентивирусной трансдукции (1:1, 10–1, 10–2). Результаты данной работы могут быть основой для проведения аналогичных исследований на культурах клеток ОМЛ