Физико-химические свойства и антибактериальная активность лактоферрина в условиях воспаления : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель И. В. Горудко

Abstract

Объектом исследования являются лактоферрин, активные формы галогенов и кислорода. Цель работы: выявление механизмов изменения структуры (аминокислотного состава, конформации) и биологических свойств лактоферрина (Лф) при модификации активными формами кислорода и галогенов (АФК и АФГ), образующимися в результате активации респираторного взрыва нейтрофилов. Основные методы проекта: флуоресцентные и фотометрические с использованием зондов АНС, флуорескамина, собственной флуоресценции триптофановых остатков. В результате показано, что изменение собственной флуоресценции лактоферрина наблюдается при действии АФГ HOCl, HOBr и Tau-Br. При модификации Лф АФГ в мольном соотношении от 10:1 до 50:1 скорость разрушения триптофановых колец была выше под действием HOBr и Tau-Br; при молярных соотношениях 100:1 для всех АФГ степень модификации триптофановых остатков в составе Лф составляла (94±3) %. С применением метки флуорескамина установлено изменение числа первичных аминов в Лф при модификации белка HOCl (в молярных соотношениях 1:50 и 1:100). С помощью флуоресцентного зонда АНС показано, что модификация Лф HOCl приводит к уменьшению числа гидрофобных участков в молекуле, модификация Tau-Br и HOBr – к их увеличению; отмечено, что модификация Лф HOBr, HOCl и Tau-Br приводит к потере железосвязывающей способности лактоферрином и, следовательно, к уменьшению его противовоспалительной, противовирусной и антимикробной активности. Научная значимость НИР заключается в том, что она вносит существенный вклад в понимание механизмов функционирования лактоферрина в условиях окислительного и галогенирующего стресса. Полученные результаты в дальнейшем будут использованы для разработки новых методов в лечении заболеваний, связанных с процессами воспаления.