Разработка тест-системы для скрининга и оценки эффективности действия блокаторов эфринового рецептора типа B2, 1.11 : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель М. В. Шолух

Abstract

Объект исследования, или разработки; комплекс эфриновый рецептор В2-эфрин. Цель НИР: создание тест-системы на основе эфринового рецептора В2 и эфрина. Методы, или методология проведения работы: молекулярно-биологические, хроматографические, спектрофотометрические, спектро-флуориметрические. В результате рекомбинантные лиганд-связывающий домен эфринового рецептора В2 и эфрин А5 экспрессированы в E.coli и выделены из телец включения; рефолдинг проведен методом разведения; белки очищены металл-хелатной и гель-фильтрационной хроматографией; лиганд-связывающий домен эфринового рецептора В2 и эфрин А5 модифицированы флуоресцентными красителями Cy3 и Сy5 соответственно; их взаимодействие детектировано сочетанием методов аффинной хроматографии с электрофорезом в полиакриламидном геле и флуориметрически. Основные конструктивные, технологические и технико-эксплуатационные характеристики: комплекс рецепторный домен-Cy3 плюс эфрин-Cy5 при длине волны возбуждения 555 нм имеет эмиссию при длине волны 670 нм. Рекомендации по внедрению или итоги внедрения результатов НИР. Область применения: биохимия, молекулярная биология, молекулярная онкология и фармакология. Полученные выводы имеют высокую социально-экономическую значимость. Прогнозные предположения о развитии объекта исследования: получение флуоресцентно меченых эфриновых белков групп А и В позволит создать новую элементную базу для иммуно-химической диагностики опухолей и скрининга противоопухолевых соединений.