Выявление молекулярных мишеней модифицирующего действия гипохлорита в клетках крови и мозга. ГПНИ «Фундаментальные основы биотехнологий» : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель Г. Н. Семенкова

Abstract

Объектом исследования являются астроциты, нейтрофилы крови здоровых людей, гипохлорит натрия, 2-амино-4-октадецен-1,3-диол, сфингозин-1-фосфат. Цель исследования – определить продукты гипохлорит-индуцированного превращения сфинголипидов в модельных и клеточных системах, выявить их биологическую активность в клетках крови и мозга. Основные методы исследования - спектрофотометрия, хемилюминесценция, флуоресценция, микроскопия, хроматография, масс-спектрометрия. В результате проведенных исследований показано, что при действии HOCl/OCl- на 2-амино-4-октадецен-1,3-диол и сфингозин-1-фосфат происходит деструкция этих сфинголипидов с образованием биологически активного продукта 2-гексадеценаля. Гипохлорит-индуцируемый процесс деструкции протекает по свободнорадикальному механизму с образованием и дальнейшей фрагментацией N-центрированных радикалов из молекул исходных липидов. Установлено, что 2-гексадеценаль является одним из продуктов неферментативной свободнорадикальной деструкции сфинголипидов в эритроцитах и астроцитах при галогенирующем стрессе. Выявлено, что 2-гексадеценаль в микромолярных концентрациях повышает редокс-активность стимулированных к фагоцитозу нейтрофилов и астроцитов в логарифмической фазе роста. Показано, что 2-гексадеценаль индуцирует в нейтрофилах и астроцитах реорганизацию цитоскелета, что выражается в перераспределении и изменении уровня F-актина, изменении размеров клеток и их формы. Модификация цитоскелета в стимулированных к фагоцитозу нейтрофилах приводит к изменению их миграционной активности. Наблюдаемые в нейтрофилах и астроцитах эффекты в широком диапазоне физиологических концентраций 2-гексадеценаля не связаны с цитотоксическим действием этого альдегида по механизму некроза. Действие 2-гексадеценаля на астроциты приводит к уменьшению пролиферативной активности клеток и индуцирует апоптотические процессы с участием р38- и JNK-МАПК.