Преимущества метода ПЦР в реальном времени

Abstract

ПЦР в реальном времени (ПЦР Real-time) используется в клинико-лабораторной диагностике для выявления инфекционных агентов любой природы, для которых применение других методов (культурального, бактериологического, иммунологического) не дает достоверной информации. ПЦР Real-time используется для одновременной амплификации и измерения количества данной молекулы ДНК. Метод ПЦР в реальном времени включает в себя одновременно детекцию и количественное определение специфической последовательности ДНК в образце. Метод использует общие принципы ПЦР. Основное отличие состоит в том, что измеряется количество амплифицированной ДНК в реальном времени после каждого цикла амплификации. Для количественного определения используют два метода — флюоресцентные красители, интеркалирующие в двуцепочечные молекулы ДНК, и ДНК-зонды, которые флюоресцируют после гибридизации с комплементарными участками ДНК = Real-time PCR (PCR Real-time) is used in clinical and laboratory diagnostics to detect infectious agents of any nature for which the use of other methods (culture, bacteriology, immunology) does not provide reliable information. Real-time PCR is used to simultaneously amplify and measure the amount of a given DNA molecule. The real-time PCR method involves the simultaneous detection and quantification of a specific DNA sequence in a sample. The method uses the general principles of PCR. The main difference is that the amount of amplified DNA is measured in real time after each amplification cycle. For quantitative determination, two methods are used: fluorescent dyes intercalating into double-stranded DNA molecules, and DNA probes that fluoresce after hybridization with complementary regions of DNA