Молекулярный механизм распознавания фитопатогенных бактерий рода Pectobacterium растениями семейства пасленовых: подпрограмма «Молекулы и клетки» ГПНИ «Фундаментальные основы биотехнологий» : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель А. Н. Евтушенков

Abstract

Объектом настоящего исследования являлись бактерии Pectobacterium carotovorum, дрожжи, а также растения Solanum lycopersicum, Nicotiana tabacum и Nicotiana benthamiana. Целью работы является исследовать молекулярный механизм детекции фитопатогенов из рода Pectobacterium растениями семейства пасленовых. Работа выполнялась современными молекулярно-биологическими методами, включая ПЦР, молекулярное клонирование, направленный мутагенез, детекцию белок-белковых взаимодействий с помощью дрожжевой двухгибридной системы. Ключевым методическим подходом, наиболее критичным для выполнения работы, являлется использование вирус-индуцированный сайленсинга для инактивации генов растений с последующей оценкой изменений экспрессии генов иммунной системы методом кПЦР. Основными результатами выполненной работы являются: с использованием дрожжевой двухгибридной системы проведен скрининг компонентов иммунной системы растений на предмет взаимодействия с эффекторным белком DspE бактерий Pectobacterium carotovorum; продемонстрировано взаимодействие DspE c белками Solanum lycopersicum RLK2 и RLK5, а также RLK5 Nicotiana tabacum; не выявлено взаимодействие с TPK1b Nicotiana benthamiana и BAK1 N. tabacum; на основе вируса TRV сконструированы векторы для сайленсинга сигнальных протеинкиназ растений.