Разработать научно обоснованные принципы хромато-масс-спектрометрического и флуориметрического анализа физиологических жидкостей с целью идентификации метаболических маркеров нарушений церебральной гемодинамики и заболеваний центральной нервной системы : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель И. В. Семак

Abstract

Объект исследования: бетаин, L-карнитин, ацетилкарнитин, витамины Д3 и Д2 и их метаболиты. Предмет исследований: твердофазная экстракция, хроматографическое разделение и масс-спектрометрический анализ эндогенных соединений и их метаболитов различной химической структуры. Цель работы: разработка способов определения низкомолекулярных метаболических маркеров в сложных биоорганических матрицах. Основные методы исследований: обратнофазная высокоэффективная жидкостная хроматография, масс-спектрометрия. Результаты: Разработаны методики жидкостной экстракции витаминов Д и их метаболитов, а также твердофазной экстракции бетаина (триметилглицина), L-карнитина, ацетилкарнитина и их синтетических аналогов (3-(2,2,2-триметил-гидразиния) пропионата, 1-(N,эN,N-триметиламмония)ацетата) из сложных биоорганических матриц. Разработаны методики хроматографического разделения и масс-спектрометрического анализа бетаина (триметилглицина), L-карнитина, ацетилкарнитина, их синтетических аналогов (3-(2,2,2-триметил-гидразиния) пропионата, 1-(N,N,N-триметиламмония)ацетата), а также витаминов Д3 и Д2 и их метаболитов. С помощью разработанных подходов открыты новые пути метаболизма витаминов Д2 и Д3. Установлено, что метаболизм витаминов группы Д может протекать по альтернативному метаболическому пути с участием цитохрома Р450scc. В результате катализируемых цитохромом Р450scc реакций гидроксилирования витамина Д2 образуются 20-гидроксивитамин Д2 и 17,20-дигидроксивитамин Д2. Основным продуктом цитохром Р450scc - опосредованного пути метаболизма витамина Д3 является 20S-гидроксихолекальциферол, который затем метаболизируется в 20,22-дигидроксихолекальциферол и тригидроксикальциферол. Разработанные методики позволяют с высокой чувствительностью и селективностью проводить определение данных соединений на уровне физиологических концентраций при различных патологических состояниях центральной нервной и эндокринной систем, в том числе обусловленных нарушением церебральной гемодинамики.