Разработка и валидация методики определения декстрометорфана и его метаболитов в моче методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Abstract

Большая распространенность нарушений ритма сердца, узкое терапевтическое окно антиаритмических лекарственных средств определяют поиск путей оптимизации терапии пациентов. Важной методикой индивидуализированной терапии является оценка фармакокинетических характеристик принимаемого препарата.

С этой целью была разработана методика количественного определения декстрометорфана (как блокатора цитохрома CYP2D6, метаболизирующего антиаритмические препараты) и его метаболита декстрофана в моче методом ВЭЖХ, которая позволяет определять декстрометорфан в диапазоне концентраций 19,5–625,0 нг/мл и декстрофан в диапазоне концентраций 115–3683 нг/мл.

Эффективное хроматографическое разделение достигалось при следующих условиях: аналитическая колонка – Zorbax Eclipse XDB-С18 4,6×150 mm, 5 мкм, температура 30°С; подвижная фаза А: 0,05 М раствор натрия дигидрофосфата в воде, доводят ортофосфорной кислотой до значения pH=3,0; подвижная фаза Б: ацетонитрил, расход элюента 1,0 мл/мин; детектирование осуществляют при длине волны λ=221 нм, объем инжекции 50 мкл

Методика валидирована по показателям линейность, правильность, воспроизводимость и устойчивость растворов и апробирована при проведении фенотипирования добровольцев по изоформе CYP2D6 цитохрома Р450.