Перенос гена нативного инсулина человека в мезенхимальные стволовые клетки с помощью лентивирусной трансдукции in vitro

Abstract

Возрастающая частота заболеваемости сахарным диабетом является актуальной проблемой нашего времени. Технология использования стволовых клеток в сочетании с генноинженерными методами открывают новые перспективы для лечения этого заболевания. Нами был сконструирован бицистронный лентивирусный вектор доставки pHR-hPPI, несущий ген инсулина человека под контролем конститутивного промотора, а также репортерный ген зеленого флуоресцирующего белка eGFP. Рекомбинантные лентивирусы, полученные на основе вектора pHR-hPPI, были использованы для трансдукции мезенхимальных стволовых клеток красного костного мозга человека in vitro. Более 80% трансдуцированных клеток экспрессировали eGFP, причем доля eGFP-положительных клеток существенно не менялась на протяжении последующих трех недель культивирования модифицированных клеток. Количество РНК транскриптов гена инсулина в модифицированных клетках было в 20-50 раз выше, чем в контрольных, но в 80 раз ниже, чем в островковых клетках поджелудочной железы.