Идентификация и количественное определение рекомбинантного белка свиного лейкоцитарного α-интерферона иммуноферментными методами

Abstract

Интерфероны применяют для иммунотерапии и иммунопрофилактики широкого спектра заболеваний человека и домашних животных. Ранее был клонирован ген свиного лейкоцитарного α-интерферона (свИФН) в клетках бактерий Е. coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL. В данной работе показано накопление рекомбинантного белка с молекулярной массой 19 кДа в тельцах включения клеток штамма-продуцента в результате индуцибельной экспрессии указанного гена. Методом иммуноблоттинга доказана подлинность рекомбинантного белка, который имеет антигенные свойства свиного лейкоцитарного ИФНα. Разработан твердофазный конкурентный иммуноферментный анализ для количественного определения белка свИФН с чувствительностью 37,5 нг/мл в растворах на различных стадиях его очистки и в составе новых лекарственных препаратов.