Logo BSU

Please use this identifier to cite or link to this item: https://elib.bsu.by/handle/123456789/108439
Title: Разработка и функциональные испытания библиотеки лентивирусных векторов доставки, кодирующих анти-AML1/ETO короткие шпилечные РНК : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / научный руководитель В. В. Гринев
Authors: Гринев, В. В.
Романовская, Т. В.
Посредник, Д. В.
Ильюшенок, И. Н.
Кирсанова, О. Д.
Волохова, А. И.
Keywords: ЭБ БГУ::ЕСТЕСТВЕННЫЕ И ТОЧНЫЕ НАУКИ::Биология
Issue Date: 2013
Publisher: Минск : БГУ
Abstract: Объект исследования: функциональная роль РНК-транскриптов гибридного онкогена AML1/ETO человека при ОМЛ, положительном по транслокации t(8;21)(q22;q22). Цель исследования: разработать и испытать в функциональных исследованиях библиотеку лентивирусных векторов доставки, кодирующих кшРНК, направленных против полного спектра мРНК гибридного онкогена AML1/ETO в клетках ОМЛ человека, положительных по транслокации t(8;21)(q22;q22). Методы исследования: биоинформационный анализ и моделирование, выделение и очистка плазмидных векторов, клонирование, секвенирование, получение рекомбинантных лентивирусов, трансдукция, проточная цитометрия, ПЦР в реальном времени, вестерн- блоттинг, клоногенный тест, дифференцировочный тест. Использованные приборы: персональный компьютер HP Pavilion dv9700 Notebook с двумя операционными системами Windows VistaTM Home Premium и Ubuntu 9.04, микроцентрифуга Biofuge fresco, спектрофотометр Cary50, термоциклер ThermoHybaid, секвенатор ABI PRISM 3130, проточный цитофлуориметр FACScan. Основные результаты: Построена биоинформационная модель гибридного онкогена AML1/ETO. Разработана библиотека лентивирусных векторов доставки, кодирующих кшРНК, распознающие двадцать вариантов РНК-транскриптов, ассоциированных с транслокацией t(8;21)(q22;q22) и гибридным онкогеном AML1/ETO. Получены рекомбинантные лентивирусы на основе лентивирусных векторов доставки серии pLVTHM-shRNA. Проведена стабильная генетическая модификации клеток ОМЛ путем лентивирусной трансдукции. Установлено, что РНК- интерференция, запускаемая наработкой в генетически модифицированных лейкозных клетках кшРНК, позволяет надежно и специфично контролировать экспрессию в этих клетках целевых форм РНК, а также белков гибридного онкогена AML1/ETO. Показано, что нок-даун специфических форм РНК гибридного онкогена AML1/ETO не повышает частоту апоптоза клеток ОМЛ, содержащих транслокацию t(8;21)(q22;q22). Обнаружено, что элиминация с помощью РНК-интерференции РНК-продуктов, терминирующихся в области 3’UTR-экзонов 15а/9а, 17а/11а и 17, но не 3’UTR-экзона 12а/6а от гена ETO, приводит к снижению клоногенности и индукции миелоидной дифференцировки лейкозных клеток. Области применения: клеточная и молекулярная биология, экспериментальная генная терапия, онкогематология.
URI: http://elib.bsu.by/handle/123456789/108439
Registration number: № гос. регистрации 20114346
Appears in Collections:Отчеты 2013

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
отчет Гринев 20114346.doc6,73 MBMicrosoft WordView/Open


PlumX

Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.