Механизмы влияния альбумина, модифицированного в условиях окислительного стресса, на структурно-функциональные свойства нейтрофилов : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / научный руководитель И. В. Горудко

Abstract

Объектом исследования являются нейтрофилы крови человека. Целью работы является подбор оптимальных условий модификации человеческого

сывороточного альбумина (ЧСА) гипогалоидными кислотами (HOCl/HOBr), а также

исследование влияния галогенированного ЧСА на изменение структурно-функциональных

свойств нейтрофилов: продукцию H2O2, дегрануляцию азурофильных гранул и изменение

морфологии клеток. Методы исследования – спектрофотометрический и флуоресцентный методы, а также

электронная сканирующая микроскопия. В результате исследования подобраны оптимальные условия модификации ЧСА

гипогалоидными кислотами (HOCl/HOBr), при которых в растворе не остается

непрореагировавших гипогалоидных кислот. При модификации ЧСА гипогалоидными

кислотами в мольном соотношении 100 молекул кислоты на 1 молекулу белка разрушается

порядка 90-95 % остатков триптофана. Выявлено, что ЧСА, модифицированный HOCl/HOBr, инициирует продукцию клетками

H2O2, а также усиливает дегрануляцию азурофильных гранул нейтрофилов,

регистрируемую по выходу миелопероксидазы (МПО). Установлено, что в присутствии

хлорированного альбумина нейтрофилы становятся морфологически поляризованными по

сравнению как с контрольными клетками, так и с клетками, обработанными нативным ЧСА,

на большинстве клеток появляются псевдоподии. В совокупности, полученные данные свидетельствуют о том, что альбумин,

модифицированный гипогалоидными кислотами, образующимися в МПО-катализируемых

реакциях, способен выступать в качестве медиатора, регулирующего структурно-

функциональные свойства нейтрофилов.