Разработка экспресс-метода определения плоидности для клонального микроразмножения селекционно-ценных генотипов овощных культур : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / научный руководитель С. В. Глушен

Abstract

Объект исследования: растения-регенеранты томата и других овощных культур,

полученные методом микроклонального размножения. Цель исследования: Разработать метод идентификации гаплоидов, пригодный для

скрининга регенерантов, полученных с помощью микроклонального размножения. Методы исследования: определение кариотипа цитогенетическим методом, подсчет

количества хлоропластов в замыкающих клетках листа, выделение ядер из клеток листа и

измерение в них относительного содержания ДНК, избирательное окрашивание

замыкающих клеток устьиц флуорохромом DiOC6 с последующим измерением их размеров

и взаимного расположения. Использованные приборы: микроскоп AxioImager (Zeiss) для цитогенетических

исследований, флуоресцентный микроскоп Eclipse 50i и телекамера DS-5Mc (Nikon). Основные результаты: показано, что перспективным для использования в микроклональном

размножении растений является метод измерения относительного содержания ДНК в

изолированных клеточных ядрах, адаптированный к флуоресцентной микроскопии.

Интерес представляет также метод идентификации гаплоидов по цитометрическим

параметрам замыкающих клеток листа при условии их специфического выявления

флуорохромами. В отчете представлены отработанные процедуры этих методов,

позволяющие использовать минимальный объем исходного материала. Области применения: генетика и селекция растений, микроклональное размножение

растений.