Использование моно- и биметаллических золей золота и серебра в иммуноанализе

Abstract

Разработаны методики получения и конъюгирования наночастиц золота, серебра, биметаллических наночастиц Au—Ag(сплав) и Au (ядро) Ag (оболочка), а также композитных наночастиц Au-SnO2 биополимерами (кроличьи антитела (АТ) против иммуноглобулинов, шигеллезные и сальмонеллезные АТ). Установлено, что биоконъюгирование приводит к увеличению размеров частиц на 2-3 нм, к уширению и смещению положения пиков поглощения в спектрах золей в длинноволновую область на 3-5 нм в случае металлических и 20-25 нм в случае биметаллических и композитных золей. Разработаны методики качественного экспрессного выявления с использованием золей золота антигенов Shigella sonnei, Shigellaflexneri с чувствительностью определения (2—8)10 2 КОЕ, а также дифтерийного анатоксина с минимальной определяемой концентрацией 2 нг/см3 (дот-блот анализ). Разработан дот-блот метод выявления антигенов Salmonella enteritidis с использованием золей серебра, чувствительность метода составляет -103 КОЕ. Разработан спектрофотометрический метод количественного определения специфических АТ с использованием биоконъюгированных наночастиц золота или серебра. The methods of synthesis and conjugating of gold, silver, bimetall Au-Ag alloy or Au (core)-Ag (shell) nanoparticles and hybrid Au-SnO2nanoparticles with different proteins such as the rabbit's antibodies (AB) against immunoglobulines, Shigella's and Salmonella's AB have been developed. It was revealed that bioconjugation caused an increase in the particles size for 2- 3 nm, the broadening and displacement of the adsorption peaks in sols spectra to the long-wave side for 3-5 nm in case of metal sols and for 20-25 nm in case of bimetal and hybrid ones. The methods of qualitative express detection of Shigella sonnei, Shigella flexneri antigens with the sensitivity of (2-8)-102 CFU and also of diphtheria anatoxin with the minimal detectable concentration of 2 ng/cm3 based on the usage of gold sols (dot-blot nalysis) have been worked out. Spectrophotometric method of quantitative detection of specific AB with the usage of bioconjugated gold or silver nanoparticles has been suggested.