Создание с помощью генетических подходов продуцента феназиновых антибиотиков, обладающих противоопухолевой активностью : отчет о научно-исследовательской работе (заключительный) / БГУ ; научный руководитель И. Н. Феклистова

Abstract

Объектом исследования являлись бактерии рода Streptomyces, Burkholderia, Bacillus и Pseudomonas, способные к синтезу антибиотиков феназинового ряда, обладающих противоопухолевой активностью. Целью задания «Создание с помощью генетических подходов продуцента феназиновых антибиотиков, обладающих противоопухолевой активностью» являлось создание коллекции штаммов-продуцентов рода Streptomyces, Burkholderia, Bacillus и Pseudomonas, способных к синтезу антибиотиков феназинового ряда; отбор штаммов, обладающих противоопухолевой активностью. Основными методами исследования являются: методы молекулярной генетики и генной инженерии, микробиологические методы, биохимические, включая хроматографию, спектрофотометрию. В процессе исследований были использованы следующие приборы: весы лабораторные аналитические, центрифуги, термостаты, холодильники, сушильные шкафы, автоклав, качалки, спектрофотометры. В результате химического мутагенеза с последующим отбором на устойчивость к токсическим аналогам метаболитов ароматического пути получены и miniTn5-мутагенеза штаммы P. aureofaciens КМБУ phz 127/11, P. aurantiaca В-162/498-12 и P. chlororaphis КМБУ phz 139-31, являющиеся сверхпродуцентами 1-оксифеназина (180 мг/л), феназина (225 мг/л) и феназин-1,6-дикарбоксилата (214 мг/л) соответственно. Наработаны экспериментальные образцы антибиотиков 1-оксифеназина, феназин-1,6-дикарбоксилата и феназина, которые в диапазоне концентраций 1,25–8,75 мкг/мл оказывают цитотоксическое действие на культуру клеток глиомы человека U-251, причем полная деструкция клеток наблюдается при концентрации антибиотиков 10 мкг/мл. Оптимизированы условия культивирования штаммов-продуцентов антибиотиков феназинового ряда. В НИЛ молекулярной генетики и биотехнологии Белорусского государственного университета создана коллекция штаммов, синтезирующих антибиотики феназинового ряда, обладающие противоопухолевой активностью. Разработана технология получения антибиотика феназинового ряда, обладающего противоопухолевой активностью, включающая стадии культивирования микроорганизмов, выделения и очистки препарата антибиотика.